10.1 Приготовленные гистологические препараты рассматривают под световым микроскопом проходящего света. Сначала используют обзорные план-объективы - 10-кратные или менее, а затем - объективы со средним увеличением - до 40-кратного. Окуляры применяют с 10- или 15-кратным увеличением. Для получения достоверных результатов необходимо исследовать не менее чем по два среза с каждого из трех кусочков, отобранных от каждого образца.
10.2 При проведении идентификации животных соединительнотканных белков в исследуемом препарате следует придерживаться общей последовательности визуальной оценки микроструктуры в соответствии с ГОСТ 31479-2012 (пункт 9.3).
10.3 В ходе визуальной оценки гистологического препарата под световым микроскопом определяют наличие животных соединительнотканных белков. При этом необходимо учитывать особенности микроструктуры соединительнотканных компонентов (нативной соединительной ткани, соединительной ткани после тепловой обработки и животных соединительнотканных белков), степень их измельчения и равномерность распределения по всей массе образца.
10.4 Животные соединительнотканные белки идентифицируют на основании их микроструктурных особенностей (см. таблицу 1). Характерные микроструктурные особенности приведены на рисунках 1-6.
Примечание - От животных соединительнотканных белков следует отличать камеди гуара и рожкового дерева и каррагинаны.
Камеди гуара и рожкового дерева - клетки с округлым компактным эозинофильным веществом в центре, которое окружено широким неокрашиваемым светлым цитоплазматическим пространством.
Каррагинаны - лилово-сиреневые (базофильные) стеклоподобные структуры.
Таблица 1 - Анализируемые показатели микроструктуры образцов
Наименование | Характеристика показателя для | ||
показателя | нативной соединительной ткани | соединительной ткани после тепловой обработки | животных соединительно- тканных белков |
Состояние коллагеновых волокон соединительной ткани | Рыхлая соединительная ткань - пучки коллагеновых и эластических волокон разнообразно ориентированы и рыхло расположены.
| Пучки коллагеновых волокон набухшие, расположены параллельно или разнообразно ориентированы, структура коллагеновых пучков выражена | Пучки коллагеновых волокон набухшие, слившиеся, не имеют упорядоченного расположения или гомогенная, однородная структура с наличием фрагментов эластических волокон |
Тинкториальные свойства структурных элементов соединительной ткани при окраске гематоксилином-эозином | Коллагеновые волокна красные различной интенсивности и оттенка, ядра клеток - темно-синие | Коллагеновые волокна голубого цвета с розоватым оттенком | Структурные элементы или однородная структура светло-голубого или серого цвета, эластические волокна розового цвета.
|
10.5 На основании данных, полученных в результате гистологического исследования, выявляют присутствие животных соединительнотканных белков, проводят их качественную идентификацию и делают заключение о соответствии фактического состава исследуемого продукта указанным в действующей документации или в маркировке.
10.6 После проведения исследования препараты с окраской срезов гематоксилином Эрлиха хранят не более одного года.